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血清PCT测定方法简介
作者:管理员    发布于:2013-05-13 13:54:47    文字:【】【】【

检测PCT常用的方法有如下5种:

1)放射免疫学分析法:利用人工合成的多克隆抗体特异地识别和连接合成氨基酸降钙素原。该方法能检测正常人的血清PCT,可靠敏感度为4pm/mL,检测的是游离PCT、结合型PCT和降钙素基因相关肽前体的混合物,而不能区分上述三种物质。该法检测耗时长(1922h),且有放射性元素的污染,使用受到限制。

2)免疫化学发光法(Quantitative immune-luminometric assay PCT-L):运用双单克隆抗体,其中一个抗体是光标记的,另一个未标记的抗体固定在试管的内壁,反应过程中两个抗体与PCT分子结合而形成三明治复合体,发光部位于反应管的表面。该法操作简便,特异性强,敏感性高,测定的低限值为0.01ng/mL2h可以出结果。但需要大型专用仪器、且费用昂贵、使用不方便等缺点,限制了使用范围。

3)免疫色谱法/胶体金比色法(Semiquantitative immunechromatographic test PCT-Q):采用胶体金技术,包括胶体金标记的抗降钙素的单克隆抗体和非特异性的抗抗体,当标本(血清或血浆)加人标本孔,金标单克隆抗体与标本中的PCT结合,形成金标记的抗原抗体复合物。该复合物在反应膜上移动,与固定在膜上的抗抗体结合形成更大的复合物。当PCT浓度超过0.5ng/mL,该复合物显示红色,红色的深浅与PCT的浓度成正比,与标准比色板比较即可得出PCT的浓度范围。该法具有快速简便,易观察的特点。

4)透射免疫浊度法:样品中的PCT与试剂中的PCT单克隆抗体发生抗原-抗体反应,使反应液浊度增加,并在一定范围内反应液浊度与所加人抗原的量呈线性关系,可使用生化分析仪或其它光学检测仪器在6O0nm波长处测定反应液吸光度值,反应液吸光度值与所测PCT浓度成正比。该测定方法简便、快速,可自动化,适合于批量检测。但抗体需要量大,且准确性受到许多因素影响,因此使用较小。

5酶联免疫分析法ELISA: 将抗原或抗体吸附在固相载体表面。使抗原抗体反应在固相载体表面进行。ELISA法测定PCT,灵敏度高,但操作繁琐,准确性影响因素较多。临床使用较少。

 

 

 
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